作为一款广泛应用于细胞生物学、组织工程及临床诊断的倒置显微镜，尼康TS2系列凭借其紧凑型设计、高对比度成像技术及智能化操作界面，成为实验室研究的理想工具。本文将从基础操作、成像模式切换、荧光观测技术及日常维护四个维度，系统解析TS2显微镜的核心使用方法。

一、基础操作流程：标准化与人体工程学设计

TS2显微镜采用模块化设计，其操作流程严格遵循人体工程学原则：

1.开机准备

连接电源后，启动主电源开关（位于镜体下端），确认系统供电正常。

调节载物台高度至最低位置，避免物镜触碰样本。

将样本置于载物台中央，使用专用载玻片托板（如CS-HS载玻片托板）固定，确保样本通光孔对齐。

2.光路校准

明场模式：旋转三孔转换器选择低倍物镜（如4×），将光路切换器调至目镜观察位置。

光源调节：开启透射光闸门控制杆，通过亮度调节模块将初始光强设为60%，避免样本过曝。

柯勒照明校准：调节聚光镜高度至最高位置，取下目镜直接观察镜筒内孔径光阑，使其直径约为物镜数值孔径（NA）的80%。例如，使用10×物镜（NA=0.3）时，光阑直径应调整至0.24mm。

3.聚焦与观察

旋转粗调旋钮使载物台缓慢上升，直至样本接近物镜（约1mm距离）。

从目镜观察，反向旋转粗调旋钮使载物台下降，待样本进入视野后，切换至微调旋钮进行精细聚焦。

通过载物台位移控制器（X-Y轴向精密位移）移动样本，寻找目标观测区域。

二、成像模式切换：相差与浮雕反差技术

TS2显微镜支持多种对比度增强技术，适用于不同样本类型：

1.相差成像（Phase Contrast）

匹配相差环位置：4×物镜对应PHL环，10×/20×/40×物镜对应PH1环。

插入专用相位板，调节聚光镜孔径光阑至与物镜NA匹配（如40×物镜需关闭光阑至0.55mm）。

示例：观察活细胞动态时，相差模式可消除染色步骤，直接呈现细胞骨架及细胞器轮廓。

2.浮雕反差成像（Emboss Contrast）

激活聚光镜与目镜筒的浮雕滑块，通过右侧旋钮调节反差强度（0-10级）。

兼容玻璃与塑料培养皿，尤其适用于厚样本（如iPS细胞球体）。

优势：相比传统相差技术，浮雕反差可减少光晕干扰，提供近似三维的无眩光图像。

三、荧光观测技术：多波段激发与噪声控制

TS2-FL型号配备落射荧光模块，支持DAPI、FITC、TRITC等多色荧光标记观测：

1.操作前准备

关闭所有透射光源，切换至EPI落射照明模式。

根据荧光染料特性选择滤色块组：

DAPI系列：激发波长365nm（紫外光）

FITC系列：激发波长480nm（蓝光）

TRITC系列：激发波长540nm（绿光）

2.成像优化

在暗室环境下操作，初始光强设为最大值，通过亮度调节模块逐步降低至适宜水平。

使用NIS-Elements软件进行白平衡校准及曝光参数优化，避免荧光信号饱和。

示例：观察GFP标记的细胞时，选择480nm激发滤光片，曝光时间控制在100-300ms。

四、日常维护与故障排除

1.清洁规范

每周使用专用镜头纸清洁光学表面（物镜、目镜、聚光镜），避免划伤。

每月检查机械部件润滑状态，对载物台导轨涂抹适量硅基润滑脂。

2.关机流程

将所有光源强度归零，关闭主机电源后断开总电源。

旋转物镜转换器至空档位，防止灰尘沉降。

示例：长期闲置时，建议使用防尘罩覆盖显微镜主体，并存放于干燥环境（湿度<60%）。

3.常见故障处理

图像模糊：检查物镜是否准确处于光路中，重新校准柯勒照明。

光强不均：清洁聚光镜及滤色块表面，调整孔径光阑至匹配物镜NA。

载物台卡滞：拆卸机械平台，清洁导轨并重新涂抹润滑脂。

总结

TS2显微镜通过集成化设计与智能化功能，显著提升了细胞成像的效率与精度。从基础操作到荧光观测，研究者需严格遵循标准化流程，并结合样本特性选择合适的成像模式。定期维护与故障预防可延长设备寿命，确保长期稳定的观测性能。