作为生命科学实验室的“细胞观察利器”，尼康TS2倒置显微镜凭借其CFI60无限远光学系统、LED照明模块及人体工学设计，成为细胞培养、荧光成像等领域的首选设备。本文将从基础操作到高阶功能，系统解析TS2显微镜的使用方法。

一、设备结构与核心组件

TS2显微镜采用模块化设计，主要包含以下核心组件：

1.光学系统：CFI60无限远校正光学系统，支持明场、相差、浮雕反差及落射荧光观察。

2.照明模块：高亮度白光LED透射照明（Ts2型号）或LED透射+落射荧光照明（Ts2-FL型号），波长覆盖385-625nm。

3.载物台：平板载物台（170×247mm）或可选机械载物台（126×78mm行程），兼容35mm/100mm培养皿、微孔板及载玻片。

4.控制面板：前面板集成电源开关、透射/荧光切换按钮；左侧控制透射光亮度，右侧控制荧光强度。

5.物镜转盘：五孔物镜转盘，支持10×、20×、40×等倍率物镜快速切换。

二、基础操作流程

1. 开机准备

设备放置：将显微镜置于生物安全柜或实验台边缘，确保载物台处于低位（避免物镜碰撞）。

电源连接：接入100-240V交流电，打开前面板电源开关，LED指示灯亮起。

物镜选择：旋转物镜转盘至4×物镜（低倍物镜），避免高倍物镜直接接触载玻片。

2. 光源调节

透射光：通过左侧旋钮调节亮度，配合聚光镜光栅控制光照范围。

荧光光（Ts2-FL型号）：选择荧光波长（如488nm激发GFP），通过右侧旋钮调节强度，使用遮光板减少环境光干扰。

3. 载玻片放置

培养皿：使用专用托板（如CS-HP35）固定35mm培养皿，确保细胞层朝上。

微孔板：将96孔板置于机械载物台，通过X/Y轴旋钮定位目标孔。

载玻片：用压片夹固定玻片，调整载物台使标本对准通光孔中心。

4. 调焦与观察

低倍镜（4×/10×）：

侧面注视物镜，缓慢旋转粗调旋钮使载物台上升，直至物镜接近标本（间距约2mm）。

左眼观察目镜，反向旋转粗调旋钮下降载物台，直至出现模糊影像，再微调细调旋钮至清晰。

高倍镜（20×/40×）：

在低倍镜下将目标移至视野中央，切换至高倍物镜。

仅使用细调旋钮微调焦距，避免压碎标本。

5. 相差与浮雕反差观察

相差观察：安装相差物镜（如10×PH）及预对中相差滑块，调整聚光镜高度至75mm（ELWD聚光镜），获得高对比度细胞轮廓。

浮雕反差观察：安装浮雕反差滑块（聚光镜侧+目镜筒侧），通过调焦照明实现伪三维成像，适用于厚标本（如iPS细胞球）。

三、高阶功能应用

1. 荧光成像

滤光块选择：根据荧光标记选择滤光块（如FITC滤光块用于GFP观测）。

曝光控制：通过右侧旋钮调节LED强度，避免光漂白；使用相机端口连接CCD相机，设置适宜曝光时间。

多色荧光：Ts2-FL型号支持同时安装3种荧光LED单元，通过滤光块转盘切换波长，实现多标记共定位分析。

2. 长时程活细胞监测

环境控制：将显微镜置于培养箱内，维持37℃、5% CO₂条件。

自动聚焦：搭配尼康NIS-Elements软件，启用硬件自动聚焦功能，实现72小时连续成像。

数据管理：通过相机端口实时传输图像至计算机，使用软件进行时间序列分析。

四、关机与维护

1.关机步骤：

降低载物台至最低位，切换至4×物镜。

关闭光源（推拉亮度调节器至暗档），关闭电源开关。

取下标本，用擦镜纸清洁物镜及目镜。

2.日常维护：

定期检查LED寿命（通常＞20,000小时），更换老化光源。

使用专用清洁液擦拭机身，避免酒精腐蚀涂层。

存放时覆盖防尘罩，避免物镜受潮。

五、常见问题解决

图像模糊：检查物镜是否锁紧，重新调焦或清洁镜头。

荧光信号弱：确认滤光块匹配荧光波长，增加LED强度或延长曝光时间。

载物台抖动：检查机械载物台锁紧螺丝是否拧紧，避免外力碰撞。

尼康TS2倒置显微镜通过智能化设计与模块化扩展，为细胞研究提供了高效、精准的解决方案。掌握其操作技巧，可显著提升实验效率与数据质量，助力生命科学前沿探索。